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反相色譜柱怎么使用和維護(hù)?

點(diǎn)擊次數(shù):2059 發(fā)布時(shí)間:2021-11-30
  反相色譜柱是迄今在液相色譜中應(yīng)用的技術(shù),主要是因?yàn)樗m用于分析絕大多數(shù)的非性物質(zhì)和多的可離子化的及離子化合物。做好反相色譜柱使用及維護(hù)工作,可可以延長色譜柱使用壽命。
  1、在條件允許情況下,在使用前盡量對(duì)色譜柱按照說明書方法進(jìn)行柱效測試。以確保色譜柱的正常。
  2、硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃。
  3、樣品:盡量將樣品溶解在流動(dòng)相或性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動(dòng)相或性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物,盡量使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用溶劑(例如,流動(dòng)相為水,樣品溶劑為甲醇),為達(dá)到較好峰形,需要降低進(jìn)樣量
  4、流動(dòng)相:流動(dòng)相,是含有緩沖鹽的流動(dòng)相,盡量當(dāng)日實(shí)驗(yàn)當(dāng)日配制;如果使用了前日配制的流動(dòng)相,請(qǐng)確保流動(dòng)相pH值沒有變化,并確保流動(dòng)相沒有長菌。 流動(dòng)相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型。我們建議在的色譜柱盡量在pH2~8范圍內(nèi)使用。請(qǐng)盡量避免在常規(guī)流動(dòng)相中使用比例的水(>95%)作為流動(dòng)相,可能會(huì)造成保留時(shí)間的不穩(wěn)定或者色譜柱鍵合相的損害。
  5、色譜柱平衡:在進(jìn)行分析之前,請(qǐng)使用至少20倍柱體積的流動(dòng)相沖洗色譜柱,以使色譜柱達(dá)到平衡。
  6、色譜柱保護(hù):對(duì)于“臟”的樣品以及組分未知的樣品,請(qǐng)盡量使用在線濾器或保護(hù)柱,如果可能,使用SPE小柱對(duì)樣品進(jìn)行前處理是較好的選擇。

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